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交聯(lián)劑的應(yīng)用
交聯(lián)是通過(guò)共價(jià)鍵化學(xué)連接兩個(gè)或多個(gè)分子的過(guò)程。 該技術(shù)在與蛋白質(zhì)和其他生物分子一起使用時(shí)通常稱為生物偶聯(lián)，是許多蛋白質(zhì)組學(xué)方法的重要組成部分，包括為蛋白質(zhì)印跡和 ELISA 創(chuàng)建可檢測(cè)探針以及研究蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)和相互作用的策略

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常用蛋白交聯(lián)試劑：

產(chǎn)品	貨號(hào)
Sulfo-SMCC	YZM000951
DSS（雙琥珀酰亞胺辛二酸酯）	JH0595
DSP（二硫雙(琥珀酰亞胺丙酸酯)），Lomant 試劑	JY1302

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交聯(lián)劑概念
交聯(lián)劑（或交聯(lián)劑）是含有兩個(gè)或多個(gè)反應(yīng)末端的分子，它們能夠或化學(xué)連接到蛋白質(zhì)或其他分子上的特定官能團(tuán)（伯胺、巰基等）。 本文介紹了現(xiàn)有的交聯(lián)劑的化學(xué)性質(zhì)和種類。

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交聯(lián)劑結(jié)構(gòu)和化學(xué)概述
蛋白質(zhì)官能團(tuán)
盡管蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)復(fù)雜，包括 20 種不同氨基酸的組成和序列，但只有少數(shù)蛋白質(zhì)官能團(tuán)構(gòu)成實(shí)際生物偶聯(lián)方法的可選靶標(biāo)。事實(shí)上，只有四種蛋白質(zhì)化學(xué)靶標(biāo)占了絕大多數(shù)交聯(lián)和化學(xué)修飾技術(shù)：
※ 伯胺 (–NH2)：該基團(tuán)存在于每條多肽鏈的 N 末端（稱為 α-胺）和賴氨酸 (Lys, K) 殘基的側(cè)鏈（稱為ε-胺）。由于其在生理?xiàng)l件下的正電荷，伯胺通常是蛋白質(zhì)的外向（即在外表面上）；因此，它們通?？梢栽诓皇沟鞍踪|(zhì)結(jié)構(gòu)變性的情況下進(jìn)行偶聯(lián)。
※ 羧基 (-COOH)：該基團(tuán)存在于每條多肽鏈的 C 末端以及天冬氨酸 (Asp, D) 和谷氨酸 (Glu, E) 的側(cè)鏈中。與伯胺一樣，羧基通常位于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)的表面。
※ 巰基 (-SH)：該基團(tuán)存在于半胱氨酸 (Cys, C) 的側(cè)鏈中。通常，作為蛋白質(zhì)二級(jí)或三級(jí)結(jié)構(gòu)的一部分，半胱氨酸通過(guò)二硫鍵 (-S-S-) 在其側(cè)鏈之間連接在一起。這些必須還原為巰基，以使它們可用于大多數(shù)類型的反應(yīng)基團(tuán)的交聯(lián)。
※ 羰基 (-CHO)：通過(guò)用偏高碘酸鈉氧化多糖翻譯后修飾（糖基化），可以在糖蛋白中產(chǎn)生酮基或醛基。

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此圖描述了免疫球蛋白 (IgG) 蛋白的一般結(jié)構(gòu)。 重鏈和輕鏈通過(guò)非共價(jià)相互作用和共價(jià)鏈間二硫鍵結(jié)合在一起，形成雙邊對(duì)稱結(jié)構(gòu)。 H 鏈和 L 鏈的 V 區(qū)包含免疫球蛋白 (Ig) 分子的抗原結(jié)合位點(diǎn)。 每個(gè) Ig 單體含有兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)，據(jù)說(shuō)是二價(jià)的。 鉸鏈區(qū)是第一個(gè)和第二個(gè) C 區(qū)結(jié)構(gòu)域之間的 H 鏈區(qū)域，并通過(guò)二硫鍵連接在一起。 這種靈活的鉸鏈（存在于 IgG、IgA 和 IgD 中，但不存在于 IgM 或 IgE 中）區(qū)域允許兩個(gè)抗原結(jié)合位點(diǎn)之間的距離發(fā)生變化。 還顯示了幾個(gè)官能團(tuán)，它們是實(shí)際生物偶聯(lián)的可選擇目標(biāo)。
對(duì)于這些蛋白質(zhì)官能團(tuán)目標(biāo)中的每一個(gè)，都存在一種到幾種類型的能夠靶向它們的反應(yīng)基團(tuán)，這些反應(yīng)基團(tuán)已被用作合成交聯(lián)和修飾試劑的基礎(chǔ)。

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